Использование промежуточных векторов


Суть данного подхода заключается в том, что вначале клонируется Т-ДНК в E. coli с использованием плазмиды pBR322. Затем, фрагменты ДНК, содержащие целевой ген, встраивают в определенные места Т-ДНК, предварительно выделенной плазмиды и, полученные таким образом химерные плазмиды повторно клонируют в клетках кишечной палочки (рис. 14.2, 14.4).
Использование промежуточных векторов

Клонированные плазмиды вносят в клетки A. tumefaciens, имеющие плазмиду pTi дикого типа. В результате гомологичной рекомбинации происходит встраивание химерной Т-ДНК из промежуточного вектора в интактную pTi-плазмиду дикого типа. Полученные клоны агробактерии, несущие рекомбинантную pTi-плазмиду с целевым геном используют в опытах по трансформации растений.
Использование промежуточных векторов

  • Устойчивость трансгенных растений, обусловленная экспрессией транспортных белков
  • Перекрестная защита растений от вирусных инфекций
  • Челночные векторы на основе ДНК хлоропластов и митохондрий
  • Регенерация трансформантов
  • Гены-маркеры для отбора трансформантов
  • Электропорация и трансформация растительных протопластов
  • Метод биологической баллистики
  • pRi-плазмиды
  • Использование бинарных векторов
  • Использование Ti-плазмид

  •  

    • Яндекс.Метрика
    • Индекс цитирования