Гены-маркеры для отбора трансформантов

13-03-2014, 20:57

Поскольку частота трансформации, как правило, невелика, то в гибридные плазмиды вводят гены-маркеры для удобства отбора трансформантов на селективных средах. В качестве селективных маркерных генов используются гены устойчивости к антибиотикам из E. coli (канамицину, хлорамфениколу и т. д.), к которым чувствительны растительные клетки. Помимо генов устойчивости в качестве маркерных генов используются также репортерные гены, позволяющие выявлять трансформированные клетки в интактных растительных тканях. Примером репортерных генов являются гены, кодирующие биосинтез фермента люциферазы, выделенного из некоторых бактерий и светлячков рода. В этом случае трансформанты выделяются на общем фоне способностью к свечению. Удобным репортерным маркером является также ген бактериальной p-D-глюкуронидазы (GUS-ген), который позволяет идентифицировать трансформанты по специфическому окрашиванию селективных сред.
Для экспрессии бактериальных генов-маркеров в клетки растений вводятся соответствующие сигнальные последовательности для начала и окончания процесса транскрипции этих генов. В качестве таких регуляторных элементов используются следующие:
• 35S-промотор вируса мозаики цветной капусты (ВМЦК);
• промоторы опиновых генов pTi-плазмиды;
• промотор гена малой субъединицы фермента рибулозодифосфаткарбоксилазы;
• промотор гена белка, связывающего хлорофилл и др.

  • Другие направления в создании устойчивых к вирусам трансгенных растений
  • Молчание гена и патоген-производная устойчивость
  • Челночные векторы на основе ДНК хлоропластов и митохондрий
  • Векторы на основе генома вируса мозаики цветной капусты (ВМЦК)
  • Получение трансгенных растений без маркерных генов
  • Использование бинарных векторов
  • Использование Ti-плазмид
  • Количество бактериальных факторов патогенности и их структура
  • Hrp-гены и харпины
  • Гены авирулентности и специфические элиситоры

  •  

    • Яндекс.Метрика
    • Индекс цитирования